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制备液相的样品污染沉积怎么处理?

发布时间:2022-07-20   点击次数:158次
  制备液相流动相通过高压泵进入系统,样品溶液通过注射器进入流动相,流动相加载到色谱柱(固定相)中。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同,经过两相反复吸附-解吸分配后,各组分的运动速度有很大的不同。它被分离成一个单独的组件,然后依次从列中流出。当样品浓度通过检测器时,样品浓度被转换成电信号并传送给记录器,数据以地图的形式打印出来。
 
  制备液相溶于流动相中的各组分经过固定相时,由于与固定相发生作用(吸附、分配、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法。
 
  液相色谱是现在食品实验室中应用非常广泛的一款仪器,但是还有很多小伙伴对它的原理、使用维护等知识不太了解。今天小编就从HPLC概述、工作原理、结构组成、常见故障及维护、HPLC应用等方面来给大家科普下HPLC的基础知识。
 
  色谱图其实简单地讲是一个横坐标是时间纵坐标是电信号的二维图谱。液相色谱法,你可以简单地想象,固定相是一个多空海绵状的柱形结构,样品在孔洞中进进出出。因为各个物质的吸附能力不同,所以才会在色谱图中拉开距离。
 
  对于样品污染沉积,先用40~50度的纯水,低速正向冲洗柱子待柱压逐渐下降后,相应的提高流速冲洗柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟,对于第2种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品的污染情况而定),在用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,然后甲醇冲洗,正向冲洗柱子30分钟以上。
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