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怎么增加制备液相的柱效?

更新时间:2022-05-19浏览:803次

  制备液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
 
  制备液相色谱还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点,但也有缺点,与气相色谱相比各有所长,相互补充。液相色谱的缺点是有“柱外效应”。在从进样到检测器之间,除了柱子以外的任何死空间(进样器、柱接头、连接管和检测池等)中,如果流动相的流型有变化,被分离物质的任何扩散和滞留都会显著地导致色谱峰的加宽,柱效率降低。液相色谱检测器的灵敏度不及气相色谱。
 
  在柱层析中,溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下,泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如二氧化硅或聚合物)制成的颗粒材料。
 
  与柱色谱相比,利用泵输送,不仅可以快速分析,而且可以使用更小的颗粒作为柱填料。粒子越小,其表面积更大,通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用,可以更好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂(如水、乙腈、甲醇)的混合物。
 
  提高液相色谱中柱效的有效途径有:减小填料粒径,增加色谱柱长,使用尽量大小均一、外型规则的填料,使用合适的流速,使用合适的流动相组成,使用合适的固定相。