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制备液相色谱仪进行时,保留时间变化了该怎么办

发布时间:2022-04-14   点击次数:147次
  制备液相色谱仪基本步骤。
  一、开机
  1、接通电脑和仪器电源(接通电源之前可先把吸头拿到要使用的流动相瓶中)
  2、开仪器电源开关,一般先上后下,下为检测器开关。
  3、检查流动相是否够,仪器上记录的溶剂量时候正确。
  4、开电脑
  5、打开仪器联机软件进入界面,点击启动设置泵流速为10,此时仪器中应该有液体流出
  6、点击平衡然后点击每个波长和调整
  冲一段时间,待压力稳定后可以进样
  二、进样
  1、将进样器扭到load朝上,吸取一定量待分离液,快速注入,做过的是吸取0.2毫升。
  2、点击控制界面菜单栏中“运行控制”按钮—样品信息—设置信息存储路径(每次都要做)
  3、扭动进样器,使处于inload状态,保留时间开始计时
  4、接峰
  5、所有峰出来后,点击菜单栏中的中断—中断,准备重复进样
  三、关机
  1、点击中断后冲几分钟,将流速设为0,待压力为0后将吸头转移到甲醇中,并把流速设为10
  2、冲到已经没有东西被冲下为止,一般需要半个小时。一般此时压力早已稳定。
  3、将流速设为0,点击界面上的关闭(在启动旁边)
  4、关闭窗口,弹出的窗口都点肯定的,如确定是等
  7、关闭仪器和电脑
  6、关闭插板
  制备液相色谱仪故障主要有以下一些:
  (一)保留时间变化
  1.柱温变化:柱恒温,必要时需配置恒温箱
  2.等度与梯度间未能充分平衡:至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
  3.缓冲液容量不够:用》25mmol/L的缓冲液
  4.柱污染:每天冲洗柱
  5.柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相
  6.柱快达到寿命:采用保护柱
  (二)保留时间缩短
  1.流速增加:检查泵,重新设定流速
  2.样品超载:降低样品量
  3.键合相流失:流动相pH值保持在3~7.5检查柱的方向
  4.流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀
  5.温度增加:柱恒温
  
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