讨论下制备液相色谱仪出现“堵”“漏”怎么办？

　　制备液相色谱仪常见的故障：一是堵，二是漏。下面这两点分别展开讨论。

　　一、先讨论“堵”的情况。

　　“堵”的表现现象是柱压异常升高，直接原因是流路不畅。堵塞的主要位置是在色谱柱的前端，主要原因是流动相里有杂质，杂质的主要来源是细菌。

　　1、“堵”的原因：配制流动相时细菌污染。

　　首先，我们要认识到，一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理，直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质，也能在液相流路系统前端的过滤头上排除，真正容易引起问题的，是水中的细菌。

　　新制备的纯水在室内放置几天会长菌，而这些细菌虽然肉眼不可见，却足以堵塞柱填料颗粒的空隙，造成柱子很快报废。这是在配制流动相时造成的细菌污染的原因，解决它的方法很简单，确保水的可靠性。这里有两种方式推荐：

　　（1）理想的方式当然是购买实验室纯水机，既方便又可靠，质量也放心。缺点是价格不菲。

　　（2）成箱购买市售品牌纯净水，如，500mL一支的怡宝或娃哈哈，这些水的质量足以应付液相色谱的要求。先随机抽取一支做一下细菌平板实验，待菌落数合格方可使用。这样每次只要单独开一支即可，也很方便。每次成本2元左右。

　　这里特别指出一个细节：在绝大多数书本上，凡谈到配制流动相都会谈到后面有一个过滤的步骤。但是从我们长期使用的实际效果来说，只要能保证水的质量，这一步*可以也应当去除。

　　原因有以下三点：

　　（1）流动相过滤在理论上有好处，但是，实际操作时由于不可能做到专瓶，反而容易造成的交叉污染，对于配比复杂的流动相影响更大。

　　（2）流动相过滤在经济成本上不划算。买一套过滤装置要6000多元，且过滤器*是比较容易损坏的设备。主要是过滤片的成本太高，一片要几十元。按一般液相柱的正常使用寿命计算，过滤片的成本会远远高于色谱柱的成本。

　　（3）流动相过滤对于工作效率成本不划算。使用溶剂过滤器有一个预清洗、装备、使用、用后清洗，晾干的过程，至少也有一个小时的时间。这个成本也不能忽视。

　　（4）在实际工作未发现流动相不过滤会对柱寿命有任何影响。我们起码有6年时间没有做过流动相过滤的工作，但是和国内同行相比较，在同等使用强度下我们的柱寿命是比较长的。

　　2、“堵”的原因：使用流动相时的细菌污染。

　　指的是：

　　流动相刚开始没有长菌，在使用时却产生了细菌污染。这主要是在使用制备液相色谱仪时的一种不良使用习惯造成的。

　　3、“堵”的原因：不适当操作。

　　常见问题的有以下几种：

　　（1）在更换零件时选择的型号有误，接口不是很匹配，在拧紧的时候产生变形而使得管路堵塞。

　　（2）样品处理液净化得不干净，长期会在六通阀和柱之间形成阻塞不畅。

　　（3）在使用手动六通阀时，有些人可能由于手劲小的原因，转动的不到位，于是造成流路形成了死堵，压力快速升高超过警戒值。

　　（4）在使用金属管路作出废液管时，应当注意先在废液瓶中放一些水，并把废液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且实验使用较高浓度的缓冲盐溶液，在停机时可能在出口端结晶成块并造成堵塞。这种情况不常见，但却的确发生过。

　　以上便是今天关于讨论下制备液相色谱仪出现“堵”“漏”怎么办的全部分享了，希望对大家今后使用本设备能有帮助。