半制备液相色谱仪的开机与系统自检流程解析
1.开机准备与系统自检
电源启动顺序：先开启计算机电源，待系统稳定后依次启动高压输液泵、柱温箱、自动进样器及检测器，确保各模块自检完成。
软件联机：双击色谱工作站，输入用户权限并选择对应的色谱系统，建立仪器方法组。
2.流动相配制与仪器冲洗
流动相选择与过滤：根据样品性质配制流动相（需色谱级试剂），使用0.45μm或0.22μm滤膜过滤（有机相用有机滤膜，水相用水系滤膜）。
泵排气泡：将泵头吸滤头浸入流动相，通过注射器抽液阀排空气泡，设置流速3-5mL/min冲洗泵头5分钟，确保无气泡残留。
进样针清洗：通过软件控制自动进样器进行多次操作，或手动用纯甲醇冲洗注射器以去除气泡。
3.色谱柱平衡与基线监测
平衡系统：设置初始流速和流动相比例，运行泵至压力稳定，通过工作站实时监测基线，待基线平稳后准备进样。
柱温控制：若使用柱温箱，需提前设置温度（通常为室温或根据方法要求），确保分离条件稳定。
4.样品进样与分离
进样操作：将样品溶解过滤后，通过自动进样器或手动进样阀注入样品（典型进样量0.1-2000μL），设置保留时间并启动分离程序。
梯度洗脱：若需梯度分离，通过软件设置溶剂比例变化程序，动态混合流动相以实现高效分离。
数据采集：检测器实时采集信号（如紫外吸收或蒸发光散射信号），工作站生成色谱图并记录保留时间及峰面积数据。
5.关机与系统维护
色谱柱清洗：
若流动相含缓冲盐，先用高比例水（如90%水/10%有机相）冲洗1小时，再用纯有机相（甲醇/乙腈）冲洗30分钟，最后保存于纯有机相中。
无缓冲盐时，直接用有机相冲洗30分钟。
仪器关机：停流速后关闭工作站，依次关闭检测器、泵、柱温箱及电源，最后关闭计算机。
管路维护：长期停用时，管路需充满纯甲醇以防止溶剂挥发或污染。
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