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操作蛋白层析柱需要按照正确的流程步骤来进行

发布时间:2020-06-24   点击次数:185次
 蛋白层析柱在蛋白,多肽,抗体等等行业中占据了不容忽视的地位,广泛应用于制备分离的各类化合物。且种类齐全的填料以及柱管会为分离柱提供更良好的性能展示平台,极大地满足了广大客户实际应用的需要。
 
蛋白层析柱操作流程一般为:预处理、逆流洗柱、水洗、吸附、解吸和再生
1. 预处理:在吸附树脂的生产过程中,一般采用的是工业级原料,产品没有经过进一步纯化处理,树脂内部残留少量单体,所以在使用之前,需用水溶性溶剂对其浸泡处理,然后用去离子水通过树脂层,置换出水溶性溶剂离子方可投入使用。
2. 逆流洗柱:用水洗出去水离子及破碎填料,树脂装入后,用蒸馏水反洗树脂层,直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止。再依次用酸碱等浸泡、冲洗树脂层,至出水呈中性为止。
3. 水洗:水洗的主要目的是除去蛋白层析柱上所附着的渣滓。
4. 吸附:吸附操作自上而下(或自下而上)通液,可采用不同流速,以选取适宜条件。流出液每隔一段时间取样检测,达泄漏点停止吸附,或多柱串联达饱和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物,该过程应控制料液的速度及吸附量,大孔树脂应完全浸泡在料液里,以提高吸附效果和运行稳定性。
5. 解吸和再生:解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸剂,单柱吸附时,解吸与吸附操作对流为佳。解吸剂沸点要低以便回收处理。
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