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使用蛋白层析柱,要注意接头可不能漏气

发布时间:2022-05-13   点击次数:240次
  蛋白层析柱是凝胶层析技术中的主体,我们研究所用的就是同兴玻璃仪器,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。
 
  蛋白层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增加,样品稀释度大。
 
  层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增加,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床要有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。
 
  注意事项:
 
  1、各接头不能漏气,连接用的小乳胶管不要有破损,否则造成漏气、漏液。
 
  2、装柱要均匀,既不过松,也不过紧,要在要求的操作压下装柱,流速不宜过快,避免因此压紧凝胶。
 
  3、始终保持柱内液面高于凝胶表面,否则水分蒸发,凝胶变干。也要防止液体流干,使凝胶混入大量气泡,影响液体在柱内的流动。
 
  4、所用凝胶比较昂贵,需小心操作,实验后回收,尽量避免浪费和损失。
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